Forberedelse af en agarosegel til elektroforese

Forberedelse af agarosegel til elektroforese

Bemærk: Bær altid engangshandsker!

Trin-for-trin instruktioner

Vejning af agarosepulver:use vejepapir og en elektronisk vægt til at måle 0,3 g agarosepulver (baseret på et 30 ml system).

Forberedelse af TBST-buffer:preparer 30 ml 1x TBST-buffer i en 100 ml Erlenmeyer-kolbe.

Opløsning af agarosepulver:panbring agarosepulveret i TBST-bufferen og ryst godt.Sæt dem indtil en mikrobølgeovn og opvarm (typisk i 50 sekunder, dækket med aluminiumsfolie), indtil det er helt opløst.

Afkøling og tilsætning af nuklease:use handsker for at fjerne blandingen fra mikrobølgeovnen og lad den køle lidt af i koldt vand, indtil den er varm (ca. 60°C). Tilsæt 2 µl nuklease (Eb-erstatning) under omrystning for at blande grundigt.

Forberedelse af gelformen:

• Clæne og tørregelbakke og gelstøbeanordningaf elektroforesetanken.
•  Psnøre gelenbakkeind i den indre tank og indsæt kammen i en fast position.
• Bland agarosegelopløsningen, afkølet til ca. 65°C, og hæld den forsigtigt pågel bakkeigelstøbningsanordning, sprede det langsomt, indtil det danner et jævnt gellag på glaspladen.
• Lad det sidde ved stuetemperatur, indtil gelen størkner helt.
• Fjern forsigtigt kammen lodret og fjern tapen.
• Placer gelenbakkeind i elektroforesetanken.

Vigtigt: Sørg for, at der ikke er luftbobler ved kammens tænder. Væskens overflade skal være glat uden krusninger.

Kørsel af gelen

Indlæsning af gelen

Efter at gelen er størknet, anbring den i elektroforesetanken og hæld elektroforesebufferen, indtil gelen er nedsænket.

Forberedelse af prøver

• Tag markøren og ladebufferen ud af køleskabet.
• Tilsæt 6 µl loading buffer til prøverne og bland godt.
• Brug en mikropipette til langsomt at lægge prøverne i gelens store brønde (pas på ikke at punktere gelen og dispenser ikke hele volumen for at undgå luftbobler).
• Læg markøren i en af ​​de små brønde (husk dens position).

Start af elektroforese

• Dæk elektroforesetanken og start elektroforese umiddelbart efter påfyldning af gelen.
• Indstil spændingen til 60-100V. Prøverne vil migrere fra den negative elektrode (sort) til den positive elektrode (rød).
• Højere spænding forkorter det effektive adskillelsesområde for agarosegelen.
• Stop elektroforese, når bromphenolblåt farvestof når omkring 1 cm fra den nederste kant af gelpladen.

Observation af resultater

Efter adskillelse af båndene skal du stoppe elektroforese, tage gelen ud og direkte opdage og fotografere den.

Brug et gel-billeddannelsessystem til at fotografere og observere båndene (tjek om der er bånd til markøren eller prøverne).

Når du har fået dit gelbåndkort, skal du finde markøren. Baseret på markøren kan du bestemme målbåndene!

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) har været fremstillet elektroforeseprodukter i mere end 50 år. Vi præsenterer vores horisontale elektroforesesystemer her foragarose gelelektroforese.Vælgehorisontale elektroforesesystemerfra Beijing liuyi til dit gelelektroforeseeksperiment for at hjælpe din forskning i bioteknologiindustrien.

Vi tilbyder forskellige modeller af horisontale elektroforesetanke til støbning og småkøringagarosegeler for storeagarosegeler

Valgvejledning for vandret nedsænket gelelektroforeseenhed

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) har specialiseret sig i fremstilling af elektroforeseinstrumenter i mere end 50 år med vores eget professionelle tekniske team og R&D-center. Vi har pålidelig og komplet produktionslinje fra design til inspektion og lager samt marketingsupport. Vores hovedprodukter er Elektroforese Cell (tank/kammer), Elektroforese Strømforsyning, Blue LED Transilluminator, UV Transilluminator, Gel Image & Analysis System osv. Vi leverer også laboratorieinstrumenter som PCR instrument, vortex mixer og centrifuge til laboratoriet.

Hvis du har en købsplan for vores produkter, så tøv ikke med at kontakte os. Du kan sende os en besked på e-mail[e-mail beskyttet]eller[e-mail beskyttet], eller ring til os på +86 15810650221 eller tilføj Whatsapp +86 15810650221 eller Wechat: 15810650221.

Scan QR-koden for at tilføje på Whatsapp eller WeChat.