DNA-gelelektroforese: Analyse af genetiske fragmenter

DNA-gelelektroforese er en almindelig molekylærbiologisk teknik, der bruges til at adskille og analysere DNA-fragmenter baseret på deres størrelser. Processen involverer indlæsning af DNA-fragmenter af forskellig størrelse på en gel lavet af agarose, et kulhydrat, der findes i røde alger.

Forberedelse og støbning af agarosegelen

  1. Opløs agarose i en passende mængde elektroforesebuffer. Koncentrationen af ​​gelen bestemmes af masse-til-volumen-forholdet, såsom 1 g agarose i 100ml buffer til en 1% gel.
  2. Opvarm blandingen i en mikrobølgeovn, drej beholderen for at sikre fuldstændig opløsning af agarose.
  3. Tilsæt ethidiumbromid til gelopløsningen til en slutkoncentration på 0,5mg/ ml. Ethidiumbromid interkalerer mellem tilstødende DNA-basepar og udsender orange fluorescens under UV-lys. Bemærk, at ethidiumbromid er et kræftfremkaldende stof, så håndtering af det kræver passende sikkerhedsforanstaltninger, såsom at bære handsker.
  4. Afkøl gelopløsningen i et vandbad for at forhindre gelbakken i at vride sig på grund af høje temperaturer.
  5. Anbring en kam i gelopløsningen for at danne prøvebrønde. Vælg kamme, der passer til mængden af ​​DNA-prøve, du vil indlæse. Hæld agarosegelopløsningen igel bakkeog lad det størkne ved stuetemperatur.
  6. Når gelen er størknet, fjernes kammen. Hvis du ikke skal bruge gelen med det samme, skal du pakke den ind i plastfolie og opbevare den ved 4 ℃, indtil den skal bruges.

Klargøring og kørsel af gelen

Før elektroforesen startes, blandes DNA-prøven med loadingbuffer. Ladningsbufferen er normalt seks gange mere koncentreret og hjælper prøven med at synke til bunden af ​​brøndene og spore bevægelsen under elektroforese.

Indstil strømforsyningen til den specificerede spænding.

Tilføj nok elektroforesebuffer til geltanken til at dække gelens overflade.Sikrede korrekte elektrodeforbindelser.

Indlæs DNA-prøven og molekylvægtsmarkører i gelbrøndene.

Tænd for strømforsyningen for at starte elektroforese.

Observation af adskilte DNA-fragmenter

Efter elektroforese skal du slukke for strømforsyningen og fjerne gelen.

Brug en UV-lyskilde til at belyse gelen; DNA-fragmenter vil fremstå som orange fluorescerende bånd.

Dokumenter gelbilledet for at analysere de adskilte DNA-fragmenter.

Efter eksperimentet skal du sikre korrekt bortskaffelse af gelen og elektroforesebufferen i henhold til laboratoriets retningslinjer. Bær altid handsker, når du håndterer geler og buffere, der indeholder ethidiumbromid, for at beskytte mod eksponering for dette farlige stof.

DNA-gelelektroforese bruges i vid udstrækning inden for molekylærbiologi og genetikforskning til blandt andet estimering af DNA-molekylestørrelser, adskillelse af DNA-fragmenter, påvisning af genmutationer og DNA-fingeraftryk. Det er en enkel og effektiv eksperimentel teknik, der hjælper med at forstå sammensætningen og karakteristika af DNA-prøver.

Beijing Liuyi Biotechnology Co.Ltd, en professionel producent med fokus på elektroforeseprodukter over 50 år, tilbyder en række elektroforesetanke (kamre/celler) til gelelektroforese, såsom horisontale elektroforesetanke (kamre/celler) tilDNAgelelektroforese og vertikale elektroforesetanke (kamre/celler) til proteingelelektroforese. I mellemtiden leverer den også forskellige typer elektroforesestrømforsyning, kabinet-mørkeboksanalysator og UV-transilluminator. Du kan vælge Beijing Liuyis elektroforesetanke (kamre/celler) til at måle molekylvægten af ​​RNA og til at adskille RNA af forskellige størrelser til dit laboratorium.

Her vil vianbefaleen type vandret elektroforesetank (kammer/celle) modelDYCP-31DN at lave og køre gelen.

1

Efter at have kørt gelen, kan du bruge vores gelbillede- og analysesystemmodelWD-9413Bat observere, analysere og tage billeder til gelen. Liuyi Biotech tilbyder også UV transilluminator (UV Analyzer) til at observere gelen. Vi har sort-boks type UV transilluminator (UV Analyzer) modelWD-9403A,9403C,WD-9403F, bærbar UV transilluminator (UV Analyzer) modelWD-9403Bog håndholdt UV transilluminator (UV Analyzer)WD-9403Efor du vælger.

2

Beijing Liuyi-mærket har mere end 50 års historie i Kina, og virksomheden kan levere stabile produkter af høj kvalitet over hele verden. Gennem mange års udvikling er den værdig til dit valg!

Vi søger nu partnere, både OEM elektroforesetank og distributører er velkomne.

Hvis du har en købsplan for vores produkter, så tøv ikke med at kontakte os. Du kan sende os en besked på e-mail[e-mail beskyttet]eller[e-mail beskyttet], eller ring til os på +86 15810650221 eller tilføj Whatsapp +86 15810650221 eller Wechat: 15810650221.


Indlægstid: Aug-08-2023